ARTICOLE ORIGINALE ARTIGOS ORIGINALIS

Analiza impedanței bioelectrice și antropometria pentru determinarea compoziției corpului la șobolani: efectele dietelor bogate în grăsimi și bogate în zaharoză

Bioimpedanța electrică și antropometria în determinarea compoziției corporale a șobolanilor: efectele dietelor bogate în lipide și zaharoză

Larissa Rodrigues Neto AngélocoI; Rafael DeminiceI, II; Izabel de Arruda LemeI; Renata Cristina LataroI; Alceu Afonso JordãoI

IUniversitatea din São Paulo, Facultatea de Medicină din Ribeirão Preto, Laboratorul de Nutriție și Metabolism. Av. Bandeirantes, 3900, 14049-900, Ribeirão Preto, SP, Brazilia. Corespondență către / Corespondență către: AA JORDÃO. E-mail: < [email protected] >
IIUniversity of Londrina, Facultatea de Educație Fizică și Sport, Departamentul de Educație Fizică. Londrina, PR, Brazilia

REZUMAT

OBIECTIV: Scopul prezentului studiu a fost de a determina impedanța șobolanilor Wistar tratați cu diete bogate în grăsimi și bogate în zaharoză și corelarea lor biochimică și parametrii antropometrici cu analiza chimică a carcasei.
METODE: Douăzeci și patru de șobolani masculi Wistar au fost hrăniți cu o dietă standard (AIN-93), bogată în grăsimi (50% grăsime) sau bogată în zaharoză (59% din zaharoză), timp de 4 săptămâni. Au fost măsurate circumferința abdominală și toracică și lungimea corpului. Analiza impedanței bioelectrice a fost utilizată pentru a determina rezistența și reactanța. Compoziția finală a corpului a fost determinată prin analize chimice.
REZULTATE: Un aport mai mare de grăsimi a condus la un procent ridicat de grăsimi hepatice și colesterol și apă totală scăzută din corp în grupul cu conținut ridicat de grăsimi, dar aceste modificări ale profilului biochimic nu au fost reflectate de măsurătorile antropometrice sau variabilele analizei impedanței bioelectrice. Modificările analizei impedanței antropometrice și bioelectrice nu au fost observate în grupul cu zaharoză înaltă. Cu toate acestea, s-a găsit o asociere pozitivă între grăsimea corporală și trei variabile antropometrice: indicele de masă corporală, indicele Lee și circumferința abdominală.
CONCLUZIE: Analiza impedanței bioelectrice nu s-a dovedit a fi sensibilă pentru detectarea modificărilor compoziției corpului, dar indicele de masă corporală, indicele Lee și circumferința abdominală pot fi utilizate pentru estimarea compoziției corpului șobolanilor.

Indexare termeni: Antropometrie. Analiza impedanței bioelectrice. Dietă. Șobolani.

REZUMAT

OBIECTIV: Determinarea impedanței șobolanilor tratați cu diete bogate în lipide și zaharoză prin metoda bioimpedanței electrice și corelarea cu analiza directă a carcasei, parametrii biochimici și antropometric.
METODE: Au fost folosiți 24 de șobolani masculi (Wistar), care au fost hrăniți cu o dietă standard, bogată în lipide sau bogată în zaharoză timp de 4 săptămâni. Grupul de control a primit dieta standard AIN-93; dieta hiperlipidică conținând 50% lipide, din care 70% erau grăsimi saturate; iar grupul bogat în zaharoză a fost hrănit cu o proporție mai mare de carbohidrați simpli, fără modificări în cantitatea totală.
REZULTATE: Aportul mai ridicat de lipide a dus la o creștere a procentului de grăsimi hepatice și colesterol și a redus cantitatea de apă totală din grupul hiperlipidic, cu toate acestea, aceste modificări ale profilului biochimic nu au fost reflectate în modificările sau modificările antropometrice. în parametrii bioimpedanței electrice. Modificări în antropometrie și bioimpedanță electrică nu au fost observate în grupul bogat în zaharoză. Cu toate acestea, s-a observat o asociere pozitivă între grăsimea carcasei și trei parametri antropometrici, adică indicele de masă corporală, indicele Lee și circumferința abdominală.
CONCLUZIE: Impedanța bioelectrică nu a fost sensibilă la detectarea modificărilor compoziției. parametrii – indicele de masă corporală, indicele Lee și circumferința abdomenului – pot fi utilizați pentru a estima compoziția corpului la șobolani.

Termeni index: antropometrie. Bioimpedanță electrică. Dietă. Șoareci.

INTRODUCERE

Compoziția corpului este de obicei evaluată pentru a determina deficiențele sau excesele componentelor corpului, cum ar fi masa slabă și masa grasă, care permit înțelegerea stării nutriționale1. Marea importanță a acestei evaluări este că greutatea corporală singură nu reflectă dacă există prea mult sau prea puțin din aceste componente ale corpului, care pot fi periculoase2. În plus, modificările compoziției corpului pot avea un impact asupra metabolismului, deoarece țesutul adipos modulează homeostazia lipidelor și glucozei3.

Metodele exacte pentru determinarea compoziției corpului animalelor sunt extrem de importante pentru a înțelege modul în care organismul răspunde la aportul de nutrienți și pentru studii nutriționale și fiziologice4,5 care utilizează modele animale pentru a investiga efectele obezității și deficiențele de nutrienți6 , 7.

Analiza chimică directă a carcasei este metoda de referință pentru determinarea compoziției corpului șobolanului8. Cu toate acestea, chiar dacă analiza chimică directă oferă informații mai precise, este invazivă, consumatoare de timp, costisitoare și necesită cunoștințe tehnice. De asemenea, nu poate fi utilizat la animale vii1, deci utilizarea sa este limitată.

În încercarea de a depăși dezavantajele analizei chimice directe a carcasei, au fost utilizate tehnici indirecte pentru determinarea compoziției corpului animalelor8. Interesul pentru impedanța bioelectrică (BIA) a crescut recent, deoarece este o metodă neinvazivă, ieftină, rapidă și reproductibilă9 care oferă o estimare bună a compoziției corpului10. Mai mult, poate fi utilizat în mod repetat pe același animal provocând perturbări minime1,11. Cu toate acestea, precizia estimării va depinde de ecuația utilizată și de standardizarea condițiilor de testare12.

Deoarece impedanța bioelectrică se bazează pe principiul că țesuturile au impedanțe diferite, adică opoziție cu fluxul unui curent electric, care, la rândul său, depinde de conținutul de apă și electroliți, 13 și presupunând că masa fără grăsimi are un conținut de apă și rezistivitate constante, apa corporală totală (TBW) și masa fără grăsimi (FFM) pot fi estimate prin măsurarea impedanței electrice a corpului14.

Studiile care iau în considerare aceste informații pentru utilizarea BIA la animale au arătat că BIA poate fi utilizat pentru prezicerea apei corporale totale a animalelor, dar nu există formule specifice care să distingă masa slabă de cea grasă1 , 11,15. În plus, puține studii au folosit această metodă la șobolani și niciun studiu nu a investigat dacă dieta afectează compoziția corpului și dacă BIA ar fi capabil să detecteze modificări subtile.

Sunt necesare mai multe studii care utilizează BIA pe animale vii pentru a determina dacă această tehnică poate determina cu exactitate compoziția corpului șobolanilor și dacă dieta afectează compoziția corpului animalelor experimentale.

Obiectivul prezentului studiu a fost de a determina impedanța șobolanilor Wistar hrăniți cu diete bogate în grăsimi și bogate în zaharoză. de către BIA și pentru a verifica dacă rezultatele sunt corelate cu cele obținute prin analiza chimică directă a carcasei și măsurători biochimice și antropometrice.

METODE

Animale și tratament

Studiul a inclus 24 de șobolani Wistar masculi cu o greutate medie inițială de 65 g, obținuți de la Facultatea Centrală pentru Animale din Școala de Medicină Ribeirão Preto, Universitatea din São Paulo (FMRP / USP). Proiectul a fost aprobat de Comitetul de Etică FMRP / USP Cercetări pe animale, protocoale numarul ol 147/2008. Animalele au fost adăpostite în cuști individuale în cadrul unui ciclu alternativ de lumină / întuneric de 12 ore, temperatura medie de 22 ° C și acces gratuit la alimente și apă.

Grupului de control i sa dat dieta standard AIN-9316, iar grupului bogat în grăsimi i s-a dat o dietă HF conținând 15% grăsimi, adaptată de la Reeves și colab.16, așa cum este descris în Tabelul 117. Grăsimi în dieta martor provine exclusiv din uleiul de soia și din dieta HF, din untură de porc (70,00%) și ulei de soia (30,00%). Dieta HS avea o compoziție diferită de carbohidrați, adică carbohidrați mai simpli: în timp ce dieta martor conținea în principal amidon de porumb, dieta HS conținea 3,50% amidon de porumb și 59,85% zaharoză18 (Tabelul 1).

Animalele erau cântărit o dată pe săptămână de un cântar electronic Filizola® cu o capacitate de 1.500 grame și o precizie de 1 gram. Aportul alimentar a fost monitorizat prin cântărirea alimentatoarelor de trei ori pe săptămână în perioada de studiu.

La sfârșitul intervenției de 4 săptămâni, impedanța corpului animalelor a fost măsurată prin BIA și animalele au fost sacrificate prin decapitare Ficatul și sângele au fost colectate, serul a fost separat și toate obiectele au fost imediat înghețate până la utilizare. Restul animalelor a fost, de asemenea, înghețat până la analiza chimică directă a carcasei.

Măsurători antropometrice

Lungimea corpului a fost măsurată de la nară până la baza cozii (joncțiunea pelvino-caudală); circumferința abdominală în punctul imediat anterior față de picior și circumferința pieptului la locul imediat în spatele membrului anterior19. Șobolanii au fost anesteziați cu 2 % tribromoetanol pentru măsurători.

Pentru toate măsurătorile a fost utilizată o bandă de măsurare non-elastică.

IMC a fost determinat prin împărțirea greutății animalului (g) la pătratul său lungime (cm). Indicele Lee a fost determinat prin împărțirea rădăcinii cubice a greutății corporale (g) la lungimea de la nas la an (cm) 20.

Impedanță bioelectrică

Rezistența întregului corp ( WBR) și Reactanța (WBXc) au fost măsurate cu ajutorul unui analizor de impedanță bioelectrică tetrapolar sensibil la fază (Byodinamics BIA 310E). Ace electrice standard au fost utilizate ca electrozi.Șobolanii au fost anesteziați și puși pe stomac pe o suprafață neconductivă pentru a elimina interferențele de la inducția electrică. Suprafețele dorsale ale capului și ale corpului au fost ras pentru așezarea electrozilor acului. Electrodul sursă 1 a fost plasat pe linia mediană pe marginea anterioară a orbitei, iar electrodul sursă 2 a fost plasat la 4cm de baza cozii. Electrodul detector 1 a fost plasat pe deschiderea anterioară a urechii și electrodul detector 2 a fost plasat în regiunea mediană a bazinului1. Toate măsurătorile de impedanță au fost efectuate la animale bine hrănite și hidratate.

Metode de laborator

Analize biochimice

Grăsimea hepatică a fost determinată după cum sugerează Bligh & Dyer21. Colesterolul și proteinele serice totale și glucoza din sânge au fost determinate prin reacții colorimetrice, folosind kitul de enzime LABTEST®.

Analiza chimică directă a carcasei

La sfârșitul celor patru săptămâni intervenție, animalele au fost sacrificate prin decapitare și congelate până la analiza chimică a carcasei. Pielea, viscerele, capul și picioarele au fost aruncate, folosind doar oase și mușchi pentru analiza cantitativă a apei, a grăsimilor și a proteinelor22. Conținutul de apă a fost determinat prin plasarea individuală a carcaselor goale în foi de aluminiu într-un cuptor la 105 ° C timp de 24 de ore. Cantitatea de apă prezentă în carcasă a fost calculată prin scăderea greutății carcasei uscate din greutatea de bază a carcasei. Carcasele uscate au fost apoi macerate și grăsimea extrasă prin extracție intermitentă folosind eter de petrol și un extractor Soxhlet. Grăsimea carcasei a fost calculată prin diferența de greutate. Conținutul de proteine a fost calculat prin metoda micro-Kjeldahl23, o metodă indirectă de determinare a azotului, utilizând factorul 6,25 pentru conversia în proteine. Toate analizele au fost repetate de trei ori la laboratorul de nutriție și metabolizare FMRP / USP.

Analiză statistică

Datele sunt exprimate ca mijloace (M) și deviație standard (SD). Analiza varianței (ANOVA) urmată de testul post-hoc Tukey au fost utilizate pentru investigarea posibilelor diferențe în parametrii studiului și regresia liniară pentru investigarea posibilelor corelații între variabilele studiului. Nivelul de semnificație a fost stabilit la 5% (p < 0.05) pentru toate analizele.

REZULTATE

Tabelul 2 arată greutatea și alimentele aportul grupurilor. Grupul HF a consumat în mod semnificativ mai puține alimente (g / săptămână) decât grupurile C și HS, dar grupurile nu au diferit în ceea ce privește aportul de energie (kcal / săptămână). Toate animalele au avut greutăți de bază și finale similare și creștere în greutate în timpul intervenției.

Grupul HF a avut un conținut de grăsime hepatică semnificativ mai mare și un nivel seric de colesterol decât grupul C. Între timp, grupul HS a avut un nivel semnificativ mai ridicat de glicemie decât grupul HF. Grupul HF a avut semnificativ mai puține proteine totale decât grupurile C și HS.

Tabelul 3 prezintă circumferințele, IMC și indicele Lee al animalelor. Aceste variabile nu au diferit semnificativ între grupuri și nici rezistența sau reactanța nu au fost prezentate în tabelul 4.

Tabelul 5 prezintă compoziția carcaselor determinată prin analize chimice directe. Numai TBW și proteinele au diferit semnificativ între grupuri (p < 0.05): au fost mai mici în grupul HF decât în grupurile C și HS.

Figura 1 prezintă corelațiile pozitive găsite între grăsimea carcasei și IMC, indicele Lee și circumferința abdominală. S-a găsit o corelație negativă (p < 0,05) între grăsimea carcasei și reactanța (r = -0,51). Cu toate acestea, nu s-a găsit nicio corelație între grăsimea carcasei și rezistența determinată de BIA.

DISCUȚIE

Efectele diferitelor aporturi de macronutrienți au fost studiate pe larg la animalele de laborator. Cu toate acestea, sunt disponibile puține informații despre efectul diferitelor aporturi de macronutrienți asupra compoziției corpului și a variabilelor antropometrice ale rozătoarelor în general. De asemenea, se știe puțin despre validitatea acestor metode pentru evaluarea antropometrică a acestor animale.

Există mai multe studii experimentale care investighează efectele dietelor bogate în grăsimi și bogate în zaharoză asupra șobolanilor, deoarece aceste diete promovează metabolizarea modificări, dar, de obicei, își evaluează efectul doar asupra greutății corporale24-26. BIA poate măsura cu precizie masa slabă și grasă și această distincție este importantă deoarece excesul de grăsime corporală compromite sănătatea și poate promova dezvoltarea intoleranței la glucoză și a dislipidemiei. Important, BIA poate fi utilizat în mod repetat pentru determinarea compoziției corpului animalelor vii, în timp ce analiza chimică directă necesită sacrificarea.

În prezentul experiment, circumferința abdominală, indicele Lee și IMC (Figura 1) s-au corelat semnificativ cu corpul compoziţie. Corelația pozitivă găsită între grăsimea carcasei și IMC este în acord cu Novelli și colab.19, care a sugerat că IMC poate estima în mod fiabil grăsimea corporală la șobolani, chiar dacă nu este suficient de sensibilă pentru a detecta modificările corpului care decurg din diete cu diferite compoziții de macronutrienți. Contrar experimentului prezent, studiul citat nu a arătat datele referitoare la corelația dintre grăsimea carcasei și indicele Lee și circumferința abdominală. Astfel, viitoarele studii ar trebui să investigheze cât de exact pot varia aceste variabile să reflecte modificările compoziției corpului.

Impedanța bioelectrică este utilizată la om ca metodă rapidă, neinvazivă și reproductibilă pentru determinarea compoziției corpului și a conținutului de apă27,28. Cu toate acestea, puține studii au folosit această tehnică la animalele de laborator11,29,30, deci această metodă trebuie investigată în continuare.

În mod surprinzător, rezultatele prezente au demonstrat că datele de rezistență nu se corelează cu grăsimea carcasei determinată chimic, sugerând că BIA nu este suficient de sensibil pentru a măsura compoziția corporală a șobolanilor sau pentru a detecta diferențele în grupurile care primesc diferite diete. Un alt dezacord s-a referit la reactanța, care a fost corelată negativ cu grăsimea carcasei, spre deosebire de Hall și colab.1, în care reactanța, în comparație cu rezistența, nu a fost considerată un predictor puternic al niciunei componente ale corpului. Acest studiu a constatat, de asemenea, variații largi intragrup, care arată eterogenitatea acestor animale și răspunsurile lor diferite la aceeași dietă.

Spre deosebire de rezultatele actuale, alte studii au arătat că BIA este suficient de sensibilă pentru a determina corpul șobolanilor. compoziţie. Într-un studiu de pionierat, Hall și colab.1 au dezvoltat o metodă adecvată pentru utilizarea BIA la șobolani și au găsit o corelație negativă puternică între rezistența întregului corp (WBR) măsurată la 50 kHz și apa corporală totală și proteine. Yoki și colab.31 au folosit formula empirică propusă de Hall și colab.1 pentru a estima apa corporală totală a șobolanilor hrăniți cu o dietă de control și o dietă suplimentată cu metionină sau homocisteină și au demonstrat că această formulă era capabilă să detecteze diferențele dintre grupuri. . Spre deosebire de prezentul studiu, nu au existat corelații între această formulă și variabilele de compoziție corporală. De asemenea, nu au existat diferențe între grupurile hrănite cu diete diferite. Rutter și colab.11 au menționat că BIA ar putea fi utilizată pentru a estima apa totală a corpului la șobolanii martori, deși metoda a fost mai puțin precisă când procedura a fost utilizată la șobolanii care au primit o dietă bogată în grăsimi.

Prezentul rezultatele arată că aportul de grăsimi al grupului HF și aportul de zaharoză al grupului HS au fost considerabil mai mari (HF: 389% și HS: 512%) decât cele ale grupului martor în perioada de intervenție, în ciuda aportului mai mic de alimente și a aceleiași energii admisie. Tendința șobolanilor de a consuma mai puține alimente bogate în grăsimi este confirmată de alte studii32,33. Această modificare a aportului de alimente se poate datora unui mecanism la șobolani care reglează aportul de alimente, reducând aportul de alimente atunci când dieta este densă din punct de vedere energetic34.

Cu toate acestea, un aport mai mare de grăsimi crește grăsimea hepatică și colesterolul și reduce corpul total apă, demonstrând că dietele bogate în grăsimi modifică profilul lipidic al animalelor. Cu toate acestea, aceste modificări în biochimia sângelui nu au fost reflectate de variabilele antropometrice sau BIA, ceea ce este în dezacord cu majoritatea rapoartelor din literatură11,29. Astfel, este posibil ca durata intervenției de studiu să nu fi fost suficientă pentru a schimba compoziția corpului, ci suficient pentru a schimba profilul biochimic, deoarece se schimbă mai ușor sau că ar fi necesară o dietă cu proporții diferite de grăsimi. De asemenea, unele studii au arătat că acumularea ridicată de grăsimi la șobolani nu depinde de vârsta sau sexul animalelor, deși genetica poate influența retenția de grăsime35. Standardizarea BIA la șobolani cu dezvoltarea de dispozitive mai mici și ecuații specifice ar putea oferi rezultate mai precise.

CONCLUZIE

În concluzie, BIA nu a fost capabil să detecteze modificările compoziției corpului la șobolanii hrăniți -diete grase și bogate în zaharoză. Cu toate acestea, grăsimea carcasei a fost semnificativ asociată cu IMC, indicele Lee și circumferința abdominală, sugerând că acești parametri pot fi utilizați pentru estimarea compoziției corpului șobolanilor. Este nevoie de mai multe cercetări folosind BIA pentru a evalua grăsimea corporală a animalelor hrănite cu diferite diete. Asocierile dintre dietă și compoziția corpului și modul în care se modifică compoziția corpului în timp, ar putea fi investigate fără a fi nevoie să ucidă animalele.

RECUNOAȘTERE

Acest studiu a fost sponsorizat de Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo (numărul grantului 2008 / 11704-0).

CONTRIBUȚII

LRN ANGÉLOCO și R DEMINICE au planificat și au realizat experimentul, au analizat datele și au scris manuscrisul. IA LEME a ajutat la realizarea experimentului, a standardizat BIA la șobolani, a analizat datele și a scris manuscrisul. RC LATARO a ajutat la realizarea experimentului, a colectat date de laborator și a analizat datele. AA JORDÃO a ajutat la planificarea experimentului, a analizat datele și a scris manuscrisul.

1. Sala CB, Lukaski HC, Marchello MJ.Estimarea compoziției corpului șobolanului utilizând analiza impedanței bioelectrice tetrapolare. Nutri Rep Int. 1989; 39 (3): 627-33.

6. Hariri N, Thibault L. Obezitate indusă de dietă bogată în grăsimi la modelele animale. Nutr Res Rev. 2010; 23 (2): 270-99.

8. Trocki O, Baer DJ, Castonguay TW. O evaluare a utilizării conductivității electrice totale a corpului pentru estimarea compoziției corpului la șobolani adulți: efectul obezității alimentare și al suprarenalectomiei. Fiziol Comportament. 1995; 57 (4): 765-72.

12. Institute Naționale de Sănătate. Analiza impedanței bioelectrice în măsurarea compoziției corpului: Declarația Conferinței Institutelor Naționale de Evaluare a Tehnologiei Sănătății. Sunt J Clin Nutr. 1996; 64 (3): 524S-32S.

14. Ward LC, Doman D, Jebb SA. Evaluarea unui nou instrument de impedanță bioelectrică pentru predicția masei celulelor corpului independent de înălțime sau greutate. Nutriție. 2000; 16 (9): 745-50.

16. Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC. Dietele purificate AIN-93 pentru rozătoare de laborator: raport final al comitetului ad hoc de redactare al Institutului American de Nutriție privind reformularea dietei rozătoarelor AIN-76A. J Nutr. 1993; 123 (11): 1939-51.

17. Sabbatini AB, Penati A C, Santos RDS, Tostes LM, Vieira LC, Lamas J. Efeitos de uma dieta hiperlipídica em ratos Wistar. Anais do 14º Simpósio International de Iniciação Científica da USP, 2006; Ribeirão Preto.

18. Castro GSF, Almeida LP, Vannucchi H, Portari GV, Jordao AA. Efectele dietelor care conțin diferite tipuri de carbohidrați asupra metabolismului hepatic. Scand J Lab Anim Sci. 2008; 35 (4): 321-28.

20. Bernardis LL, Patterson BD. Corelația dintre „indicele Lee” și conținutul de grăsime din carcasă la șobolani înțărcați și femele adulte cu leziuni hipotalamice. J endocrinol. 1968; 40 (4): 527-8.

22. Franco FSC, Natali AJ, Costa NMB, Lunz W, Gomes GJ, Carneiro Junior MA, și colab. Efectele suplimentării cu creatină și antrenamentului de putere asupra performanței și a masei corporale slabe a șobolanilor. Rev Bras Med Esporte. 2007; 13 (5): 297-302.

24. Castro GSF, Almeida BB, Leonardi DS, Ovídio PP, Jordão AA. Asocierea dintre colesterolul hepatic și acidul oleic din ficatul șobolanilor tratați cu ulei vegetal parțial hidrogenat. Rev. Nutr. 2012; 25 (1): 45-56. doi: 10.1590 / S1415-52732012 000100005.

26. Liu SH, He SP, Chiang MT. Efectele hrănirii pe termen lung a chitosanului asupra răspunsurilor lipidice postprandiale și a metabolismului lipidic într-un model de șobolan tolerant la glucoză cu slăbiciune ridicată a dietei. J Agric Food Chem. 2012; 60 (17): 4306-13.

29. Ilagan J, Bhutani V, Archer P, Lin PK, Jen KL. Estimarea modificărilor compoziției corpului în timpul ciclului de greutate prin analiza impedanței bioelectrice la șobolani. J Appl Physiol. 1993; 75 (5): 2092-8.

30. Cornish BH, Ward LC, Thomas BJ. Măsurarea apei corporale extracelulare și totale a șobolanilor utilizând analiza impedanței bioelectrice cu frecvență multiplă. Nutr Res. 1992; 12 (4-5): 657-66.

31. Yokoi K, Lukaski HC, Uthus EO, Nielsen FH. Utilizarea spectroscopiei de bioimpedanță pentru a estima distribuția apei corpului la șobolani hrăniți cu aminoacizi cu conținut ridicat de sulf. J Nutr. 2001; 131 (4): 1302-8.

32. Estrany ME, Proenza AM, Lladó I, Gianotti M. Aportul isocaloric al unei diete bogate în grăsimi modifică adipozitatea și manipularea lipidelor într-un mod dependent de sex la șobolani. Sănătate lipidică Dis. 2011; 12: 10-52.

33. Nakashima Y, Yokokura A. Consumul unei diete bogate în grăsimi care conține untură de porc în timpul perioadei de creștere la șobolani îi predispune să răspundă favorabil dietei în viața ulterioară. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 2010; 56 (6): 380-6.

35. Ellis J, Lacul A, Hoover-Plough J. Uleiul de canola mononesaturat reduce depunerea de grăsimi la șobolanii femele în creștere, hrăniți cu o dietă bogată sau cu conținut scăzut de grăsimi. Nutr Res. 2002; 22: 609-21.