Segundo a lenda, a cidade de Roma foi fundada em 753 aC nas margens do Tibre, a cerca de 25 quilômetros (16 milhas) do mar em Ostia. A Ilha Tiberina, no centro do rio entre Trastevere e o antigo centro da cidade, foi o local de um importante vau antigo e foi posteriormente interligado. A lenda diz que os fundadores de Roma, os irmãos gêmeos Romulus e Remus, foram abandonados em suas águas, onde foram resgatados pela loba, Lupa.
O rio marcava a fronteira entre as terras dos etruscos a oeste, os sabinos a leste e os latinos a sul. Benito Mussolini, nascido na Romagna, ajustou a fronteira entre a Toscana e a Emilia-Romagna, de modo que as nascentes do Tibre ficassem na Romagna.
O Tibre foi extremamente importante para o comércio e comércio romano, já que os navios podiam chegar até 100 quilômetros (60 milhas) rio acima; há evidências de que era usado para transportar grãos do Val Teverina já no século 5 aC . Mais tarde, foi usado para enviar pedra, madeira e alimentos para Roma.
Durante as Guerras Púnicas do século III aC, o porto de Ostia se tornou uma base naval importante. Mais tarde, tornou-se a mais importante de Roma porto, onde trigo, azeite e vinho eram importados das colônias de Roma ao redor do Mediterrâneo. Cais também foram construídos ao longo de Ele ribeirinho na própria Roma, alinhando-se às margens do rio ao redor da área do Campus Martius. Os romanos conectaram o rio com um sistema de esgoto (a Cloaca Máxima) e com uma rede subterrânea de túneis e outros canais, para levar sua água para o meio da cidade.
Romanos ricos tinham jardins-parques ou “horti” nas margens do rio em Roma até o primeiro século AC. Eles podem ter sido vendidos e desenvolvidos cerca de um século depois.
A forte sedimentação do rio dificultou a manutenção de Ostia, levando os imperadores Cláudio e Trajano a estabelecer um novo porto no Fiumicino no século I DE ANÚNCIOS. Eles construíram uma nova estrada, a via Portuensis, para ligar Roma a Fiumicino, saindo da cidade pela Porta Portese (“o portão do porto”). Ambos os portos foram eventualmente abandonados devido ao assoreamento.
Vários papas tentaram melhorar a navegação no Tibre nos séculos 17 e 18, com extensas dragagens continuando no século 19. O comércio foi impulsionado por um tempo, mas no século 20 o assoreamento fez com que o rio só fosse navegável até a própria Roma.
O Tibre já foi conhecido por suas enchentes – o Campus Martius é uma planície de inundação e inundaria regularmente a uma profundidade de 2 metros (6 pés 7 pol.). O rio está agora confinado entre altas barragens de pedra que foram iniciadas em 1876. Na cidade, as margens do rio são ladeadas por avenidas conhecidas como lungoteveri, ruas “ao longo do Tibre”.
Porque o rio é identificado com Roma , os termos “nadando no Tibre” ou “cruzando o Tibre” passaram a ser a abreviatura protestante para se converter ao catolicismo romano. Isso é mais comum se a pessoa que se converte fosse anglicana, o reverso do qual é referido como “nadando no Tamisa” ou “cruzando o Tamisa”.
Na Roma antiga, criminosos executados eram jogados no Tibre. Pessoas executadas nas escadas de Gemonian foram jogadas no Tibre durante a parte posterior do reinado do imperador Tibério. Essa prática continuou ao longo dos séculos. Por exemplo, o cadáver do Papa Formoso foi jogado no Tibre após o infame Sínodo do Cadáver realizado em 897.