Antecedentes: Embora as mutações do promotor sejam conhecidas por causar consequências funcionalmente importantes para a expressão do gene, a análise do promotor não é regular parte do diagnóstico de DNA.
Conteúdo: Esta revisão cobre diferentes aspectos importantes da análise de mutação do promotor e inclui um procedimento de modelo proposto para estudar as mutações do promotor. A caracterização de uma variação da sequência do promotor inclui um estudo abrangente da literatura e bancos de dados de mutações humanas e fatores de transcrição. A pegada filogenética também é usada para avaliar a importância putativa da região promotora de interesse. Esta análise in silico é, em geral, seguida por ensaios funcionais in vitro, dos quais os ensaios de transfecção transitórios e estáveis são considerados os métodos padrão ouro. Os ensaios de deslocamento e super deslocamento da mobilidade eletroforética são usados para identificar proteínas de ação trans que supostamente interagem com a região do promotor de interesse. Finalmente, os ensaios de imunoprecipitação da cromatina são essenciais para confirmar a ligação in vivo dessas proteínas ao promotor.
Resumo: Embora a análise de mutação do promotor seja complexa, frequentemente trabalhosa e difícil de realizar, é uma parte essencial do diagnóstico de mutações do promotor causadoras de doenças e melhora nossa compreensão do papel da regulação da transcrição em humanos doença. Recomendamos que laboratórios de rotina e grupos de pesquisa especializados em pesquisa de promotores de genes cooperem para expandir o conhecimento geral e o diagnóstico de defeitos no promotor de genes.