Antecedentes: aunque se sabe que las mutaciones del promotor causan consecuencias funcionalmente importantes para la expresión génica, el análisis del promotor no es un parte del diagnóstico de ADN.
Contenido: esta revisión cubre diferentes aspectos importantes del análisis de mutaciones del promotor e incluye un procedimiento modelo propuesto para estudiar las mutaciones del promotor. La caracterización de una variación de la secuencia promotora incluye un estudio exhaustivo de la literatura y las bases de datos de mutaciones humanas y factores de transcripción. La huella filogenética también se usa para evaluar la importancia putativa de la región promotora de interés. Este análisis in silico es, en general, seguido de ensayos funcionales in vitro, de los cuales los ensayos de transfección transitoria y estable se consideran los métodos de referencia. Los ensayos de desplazamiento de movilidad electroforética y superdesplazamiento se utilizan para identificar proteínas que actúan en trans que supuestamente interactúan con la región promotora de interés. Finalmente, los ensayos de inmunoprecipitación de cromatina son esenciales para confirmar la unión in vivo de estas proteínas al promotor.
Resumen: Aunque el análisis de mutaciones del promotor es complejo, a menudo laborioso y difícil de realizar, es una parte esencial del diagnóstico de mutaciones del promotor que causan enfermedades y mejora nuestra comprensión del papel de la regulación transcripcional en humanos. enfermedad. Recomendamos que los laboratorios de rutina y los grupos de investigación especializados en la investigación de promotores de genes cooperen para ampliar el conocimiento general y el diagnóstico de los defectos de los promotores de genes.