Resumen
El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la azitromicina sobre la pérdida del embarazo inducida por LPS. Treinta y seis ratas Wistar hembras preñadas se dividieron en 4 grupos iguales de la siguiente manera: grupo de control, en el que se administraron por vía intravenosa 0,3 ml de solución salina normal el día 10 de embarazo; grupo de azitromicina, donde la azitromicina se administró por vía oral a 350 mg kg-1 día los días 9, 10 y 11 del embarazo; grupo de lipopolisacáridos, donde se administró LPS por vía intravenosa a través de la vena de la cola a 160 μg kg-1 el día 10 de embarazo; y el grupo azitromicina + LPS, donde se administró azitromicina por vía oral a 350 mg kg-1 día los días 9, 10 y 11 de embarazo y LPS se administró por vía intravenosa a 160 μg kg-1 el día 10 de embarazo. Se obtuvieron muestras de sangre de la vena de la cola el día 10 del experimento. Se determinaron las tasas de embarazo. Los niveles de factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) e interleucina (IL-10) se midieron mediante ELISA. La azitromicina previno () la pérdida del embarazo inducida por LPS. Se midieron niveles más altos de TNF-α e IL-10 () en los grupos de LPS y azitromicina + LPS, respectivamente. En conclusión, la azitromicina puede ser útil en la pérdida del embarazo dependiente de infección o endotoxemia.
1. Introducción
El sistema inmunológico materno es capaz de reconocer y rechazar una respuesta contra los antígenos fetales. Uno de los resultados desfavorables más comunes durante el primer trimestre del embarazo es el aborto espontáneo; la tasa de aborto espontáneo es del 15% al 20% en las mujeres. Sin embargo, los mecanismos que subyacen a la pérdida del embarazo causada por infecciones maternas no están claros.
El lipopolisacárido (LPS), una endotoxina derivada de bacterias gram negativas, se ha utilizado para constituir la respuesta inflamatoria en estudios experimentales con embarazo. Es bien conocido como desencadenante del aborto y el parto prematuro a través de citocinas proinflamatorias y óxido nítrico. La producción predominante de citocinas T-helper (Th2) es una característica del embarazo normal, mientras que una producción predominante de citocinas Th1 es una característica del aborto y el aborto recurrente. Un cambio de un perfil de citocinas con sesgo Th2 a uno con sesgo Th1 en el suero materno da como resultado complicaciones para las mujeres embarazadas, como abortos espontáneos y preeclampsia.
Además del efecto antimicrobiano directo, los macrólidos también muestran efectos antiinflamatorios propiedades. La azitromicina tiene una eficacia similar en comparación con la eritromicina o la amoxicilina; La azitromicina también tiene menos efectos adversos en el tratamiento de mujeres embarazadas con infecciones por Chlamydia trachomatis. Debido a esta característica, el uso de azitromicina para tratar a mujeres embarazadas con infecciones por C. trachomatis no complicadas está aumentando entre los obstetras. La azitromicina es clínicamente eficaz en el tratamiento de infecciones respiratorias comunes, de la piel / de la estructura de la piel, uretritis no gonocócica y cervicitis por C. trachomatis. La azitromicina se clasifica como un fármaco de clase B durante el embarazo.
El equilibrio entre el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) y la interleucina (IL-10) se determina para el éxito del embarazo. Siempre que aumenta el nivel de TNF-α, se produce un aborto, mientras que la IL-10 favorece el embarazo. Debido a la inexistencia de un tratamiento preventivo adecuado de la pérdida temprana del embarazo, se ha planteado la hipótesis de que la azitromicina puede prevenir la pérdida del embarazo inducida por LPS debido a un efecto inhibidor sobre el TNF-α y un efecto potenciador sobre la IL-10.
El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la azitromicina sobre la pérdida de embarazos inducida por LPS en ratas.
2. Materiales y métodos
2.1. Animal
El protocolo del estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Universidad Necmettin Erbakan, Centro de Investigación y Aplicación de Medicina Experimental, Konya, Turquía. En este estudio se utilizaron treinta y seis ratas Wistar hembra y 9 macho (gyg, respectivamente, de 5 a 6 meses de edad). Las ratas se alimentaron con una dieta estándar granulada y se proporcionó agua del grifo ad libitum como agua para beber. Los animales se criaron en jaulas estándar en un ciclo de luz / oscuridad de 12 horas a temperatura ambiente en un ambiente con humedad controlada.
2.2. Procedimiento experimental
Se diluyeron LPS (Escherichia coli, serotipo O111: B4, Sigma-Aldrich Chemie, Deisenhofen, Alemania) y azitromicina (Zitromax, 200 mg / 5 ml, suspensión oral, Pfizer, Estambul, Turquía) con solución salina libre de pirógenos a concentraciones apropiadas.
Se enjaularon ratas hembras con machos durante 1 día y la presencia de un tapón vaginal se designó como día 0 de gestación. Del décimo al duodécimo día de gestación de una rata corresponde aproximadamente al primer trimestre de gestación humana. Las ratas preñadas se dividieron aleatoriamente en 4 grupos de la siguiente manera: grupo de control, donde 0.Se administraron 3 ml de suero fisiológico por vía intravenosa el día 10 de embarazo (); grupo de azitromicina, donde la azitromicina se administró por vía oral a 350 mg kg-1 día los días 9, 10 y 11 del embarazo (); donde el grupo LPS, LPS se administró por vía intravenosa a través de la vena de la cola a 160 μg kg-1 el día 10 de embarazo (); y el grupo azitromicina + LPS, donde la azitromicina se administró por vía oral a 350 mg kg − 1 día los días 9, 10 y 11 de embarazo y LPS se administró por vía intravenosa a 160 μg kg − 1 el día 10 de embarazo (). Se obtuvieron muestras de sangre de la vena de la cola el día 10 del experimento (3 horas después de la administración de LPS) y se siguió a todos los animales durante el embarazo. Además, se determinaron los animales que dieron y no dieron a luz. Al final del estudio, todos los animales fueron sacrificados bajo anestesia con tiopental sódico (70 mg / kg, por vía intraperitoneal; Pental Sodium 1 g iny., I. E. Ulagay Ilac Sanayi, Estambul, Turquía).
2.3. Mediciones
Las muestras se centrifugaron y las muestras de suero se almacenaron a -70 ° C hasta su análisis. Los niveles de TNF-α (eBioscience Rat TNF-α kit, sensibilidad 11 pg / mL, San Diego, CA, EE. UU.) E IL-10 (eBioscience Rat IL-10kit, sensibilidad 1,5 pg / mL, San Diego, CA, EE. UU.) Fueron determinada a 450 nm mediante kits de ELISA comerciales con lector de ELISA (MWGt Lambda Scan 200, EE. UU.).
2.4. Análisis estadístico
Las tasas de embarazo de los grupos se evaluaron mediante una prueba de chi-cuadrado y las concentraciones de TNF-α e IL-10 se compararon con ANOVA y la prueba de Tukey. Los datos se expresan como la media ± SE. El número de crías en cada grupo se evaluó mediante ANOVA y prueba de Duncan. Se aceptó la significación a nivel.
3. Resultados
Todos los animales fueron seguidos durante el embarazo. El peso medio de las ratas fue g antes del embarazo y g al final del embarazo. La azitromicina inhibió () la pérdida del embarazo inducida por LPS y no hubo efectos adversos en la tasa de embarazo (Tabla 1). El nivel de TNF-α fue mayor () en el grupo de LPS y los niveles de IL-10 fueron menores () en los grupos de azitromicina y control (Tabla 2). Además, la concentración de IL-10 en el grupo azitromicina + LPS fue significativamente mayor () que en los otros grupos (Tabla 2). La tasa de descendencia fue estadísticamente significativa () en el grupo LPS en comparación con todos los demás grupos (Figura 1).
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| LPS: lipopolisacárido (160 µg kg− 1 por vía intravenosa, Escherichia coli 0111: B4). a, bLas letras diferentes en la misma columna son estadísticamente significativas (). | ||||||||||||||||||||||||
4. Comentario
El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la azitromicina sobre el aborto séptico. Muchos agentes endógenos, como las prostaglandinas o las citocinas, desempeñan un papel fundamental durante el embarazo. El aborto espontáneo recurrente se define clásicamente como tres o más pérdidas de embarazos y generalmente ocurre antes de las 20 semanas de gestación. Recientemente, el aborto espontáneo recurrente se ha redefinido como la pérdida espontánea de dos o más embarazos clínicos. Los resultados adversos del embarazo, como el aborto espontáneo, el trabajo de parto prematuro, la preeclampsia y la restricción del crecimiento intrauterino, pueden resultar de una desregulación de las redes de citocinas.
En el estudio actual, la azitromicina sola no presentó un efecto negativo sobre la tasa de embarazo (Tabla 1). Se ha informado que el uso profiláctico de azitromicina puede disminuir la pérdida de embarazos relacionada con el procedimiento y puede ser seguro en mujeres embarazadas.
En el estudio actual, se determinaron tasas de embarazo más altas en los grupos de control y azitromicina que en el grupo LPS (Tabla 1). Además, se midió un nivel más alto de TNF-α en el grupo de LPS (Tabla 2).La respuesta inmune materna está determinada para el éxito del embarazo. Se han utilizado modelos animales para dilucidar esta cuestión. El mecanismo que subyace a la pérdida temprana del embarazo está asociado con varias moléculas inflamatorias; por tanto, es útil la modulación de los módulos inflamatorios. La inflamación excesiva puede dar lugar a resultados desfavorables, como aborto espontáneo y reabsorción fetal. Las áreas de implantación son extremadamente sensibles a las citocinas LPS y Th1 (TNF-α y lL-2) durante el embarazo temprano en ratones. Estas moléculas tienen la capacidad de inducir la resorción embrionaria. Las dosis bajas de LPS, sin afectar la supervivencia de la madre, provocan altas tasas de reabsorción embrionaria durante el embarazo temprano. La desregulación de las redes de citocinas da como resultado resultados adversos del embarazo. Las citocinas Th2, incluida la IL-10, tienen una función protectora, mientras que las citocinas Th1, incluido el TNF-α, son factores abortivos en el embarazo. El aumento de los niveles de TNF-α causado por LPS dio como resultado una perfusión placentaria insuficiente, una mejoría de los eventos trombóticos y una hipoxia fetal y placentaria. En el estudio actual, el tratamiento con LPS aumentó el nivel de TNF-α, lo que determinó una disminución en la tasa de embarazo. Se ha informado que el nivel de TNF-α aumentado por LPS está estrechamente relacionado con la pérdida recurrente del embarazo. En otro estudio, la concentración de la proteína de unión a LPS en el líquido amniótico aumentó en pacientes que tuvieron una pérdida fetal espontánea.
En el estudio actual, la azitromicina aumentó la tasa de embarazo 3,5 veces en comparación con el LPS grupo (Tabla 1). Además, se produjo una mayor concentración de IL-10 () en el grupo azitromicina + LPS que en los otros grupos, y el nivel de TNF-α fue menor () en el grupo azitromicina + LPS que en el grupo LPS (Tabla 2). La eritromicina y la azitromicina se utilizan en el tratamiento de las infecciones endocervicales por clamidia y la neumonía por micoplasma en pacientes obstétricas. La azitromicina puede ser más eficaz contra las infecciones del endometrio porque proporciona niveles tisulares importantes durante un período prolongado. El paso transplacentario de azitromicina es limitado y, en general, se acepta que la azitromicina y otros antibióticos macrólidos son seguros durante el embarazo. El aumento de las tasas de embarazo en el grupo azitromicina + LPS (Tabla 1) puede reflejar el efecto depresivo de los macrólidos sobre la producción de citocinas proinflamatorias y el efecto potenciador sobre el nivel de IL-10. Se han informado los efectos supresores de los macrólidos, incluida la azitromicina, sobre el nivel de TNF-α y los efectos potenciadores de estos fármacos sobre el nivel de IL-10. Además, las inyecciones de IL-10 previenen los abortos inducidos por LPS y disminuyen la muerte fetal inducida por LPS.
En conclusión, la pérdida del embarazo mediada por infección o endotoxemia se puede prevenir mediante el uso de azitromicina durante el período de embarazo.
Conflicto de intereses
El autor declara que no hay conflicto de intereses.
Agradecimientos
El autor agradece al Dr. Enver YAZAR y al Dr. Ibrahim AYDIN por la asistencia científica.