Abstract
이 연구의 목적은 LPS로 인한 임신 손실에 대한 아지트로 마이신의 효과. 36 마리의 임신 한 암컷 Wistar 쥐를 다음과 같이 4 개의 동일한 그룹으로 나누었습니다 : 대조군, 임신 10 일에 0.3 mL의 생리 식염수를 정맥으로 투여했습니다. 아지트로 마이신 그룹, 임신 9 일, 10 일 및 11 일에 아지트로 마이신을 350 mg kg-1 일로 경구 투여 함; 임신 10 일에 LPS를 꼬리 정맥을 통해 160 μg kg-1로 정맥 내 투여 한 리포 다당류 그룹; 아지트로 마이신 + LPS 군은 임신 9 일, 10 일, 11 일에 350mg kg-1 일로 경구 투여하고, 임신 10 일째에는 160μg kg-1로 LPS를 정맥 내 투여 하였다. 실험 10 일째에 꼬리 정맥에서 혈액 샘플을 얻었다. 임신 비율이 결정되었습니다. 종양 괴사 인자-알파 (TNF-α) 및 인터루킨 (IL-10) 수준은 ELISA로 측정되었습니다. Azithromycin은 LPS로 인한 임신 손실을 예방했습니다. 더 높은 TNF-α 및 IL-10 수준은 각각 LPS 및 azithromycin + LPS 그룹에서 측정되었습니다. 결론적으로 아지트로 마이신은 감염 또는 내 독소 혈증에 따른 임신 손실에 유용 할 수 있습니다.
1. 소개
모체 면역 체계는 태아 항원에 대한 반응을 인식하고 거부 할 수 있습니다. 임신 첫 삼 분기 동안 가장 흔한 불리한 결과 중 하나는 자발적인 낙태입니다. 자연 유산의 비율은 여성의 15 ~ 20 %입니다. 그러나 산모 감염으로 인한 임신 손실의 기전은 명확하지 않습니다. 그람 음성 박테리아에서 추출한 내 독소 인 지방 다당류 (LPS)는 임신과 관련된 실험 연구에서 염증 반응을 구성하는 데 사용되었습니다. 이것은 전 염증성 사이토 카인과 산화 질소를 통해 낙태와 조산을 유발하는 것으로 잘 알려져 있습니다. T- 헬퍼 (Th2) 사이토 카인의 우세한 생산은 정상적인 임신의 특징 인 반면, Th1 사이토 카인의 우세한 생산은 낙태 및 재발 성 유산의 특징입니다. 산모 혈청에서 Th2 편향에서 Th1 편향 사이토 카인 프로필로의 변화는 자연 유산 및 자간전증과 같은 임산부에게 합병증을 유발합니다.
직접적인 항균 효과 외에도 macrolides는 항 염증을 나타냅니다. 속성. 아지트로 마이신은 에리트로 마이신 또는 아목시실린과 비교하여 유사한 효능을 가지고 있습니다. 아지트로 마이신은 또한 클라미디아 트라코마 티스 감염에 걸린 임산부의 치료에 부작용이 적습니다. 이러한 특징 때문에 산부인과 의사들 사이에서 아지트로 마이신을 사용하여 복잡하지 않은 C. 트라코마 티스 감염을 가진 임산부를 치료하는 것이 증가하고 있습니다. 아지트로 마이신은 일반적인 호흡기, 피부 / 피부 구조 감염, 비 임균성 요도염 및 C. trachomatis로 인한 자궁 경부염의 치료에 임상 적으로 효과적입니다. Azithromycin은 임신 중 B 급 약물로 분류됩니다.
종양 괴사 인자-알파 (TNF-α)와 인터루킨 (IL-10) 사이의 균형은 임신 성공 여부를 결정합니다. TNF-α 수치가 증가 할 때마다 낙태가 일어나고 IL-10은 임신을 지원합니다. 임신 초기 손실에 대한 적절한 예방 치료가 없기 때문에 아지트로 마이신이 TNF-α에 대한 억제 효과와 IL-10에 대한 강화 효과로 인해 LPS에 의한 임신 손실을 예방할 수 있다는 가설이 세워졌습니다.
이 연구의 목적은 쥐에서 LPS로 인한 임신 손실에 대한 아지트로 마이신의 효과를 확인하는 것이 었습니다.
2. 재료 및 방법
2.1. 동물
연구 프로토콜은 터키 코니아에있는 실험 의학, 연구 및 응용 센터에있는 Necmettin Erbakan University의 윤리위원회의 승인을 받았습니다. 이 연구에는 36 마리의 암컷과 9 마리의 수컷 Wistar 쥐 (각각 g 및 g, 5-6 개월령)가 사용되었습니다. 쥐에게 표준 펠릿 사료를 공급하고 수돗물을 음용수로 자유롭게 제공했습니다. 동물은 습도 조절 환경에서 실온에서 12 시간 명암 주기로 표준 케이지에서 사육되었습니다.
2.2. 실험 절차
LPS (Escherichia coli, 혈청 형 O111 : B4, Sigma-Aldrich Chemie, Deisenhofen, Germany) 및 azithromycin (Zitromax, 200mg / 5mL, 경구 현탁액, Pfizer, Istanbul, Turkey)을 희석했습니다. 발열원이없는 식염수를 적절한 농도로합니다.
암컷 쥐를 수컷과 함께 1 일 동안 케이지하고 질 플러그의 존재를 임신 0 일로 지정했습니다. 쥐의 임신 10 ~ 12 일은 대략 인간 임신의 첫 3 개월에 해당합니다. 임신 한 쥐는 다음과 같이 무작위로 4 개의 그룹으로 나눴습니다 : 대조군, 여기서 0.임신 10 일째에 3 mL의 생리 식염수를 정맥 내로 투여 하였다 (); 아지트로 마이신 그룹, 임신 9 일, 10 일 및 11 일에 아지트로 마이신을 350mg kg-1 일에 경구 투여 함 (); LPS 그룹에서 LPS는 임신 10 일에 160 μg kg-1로 꼬리 정맥을 통해 정맥 내로 투여되었습니다 (); 및 아지트로 마이신 + LPS 그룹, 여기서 아지트로 마이신은 임신 9 일, 10 일 및 11 일에 350 mg kg-1 일로 경구 투여되었고, LPS는 임신 10 일에 160 μg kg-1로 정맥 내로 투여되었습니다 (). 실험 10 일 (LPS 투여 후 3 시간)에 꼬리 정맥에서 혈액 샘플을 얻었고 모든 동물을 임신 중에 추적했습니다. 또한 출산을 한 동물과 출산하지 않은 동물이 결정되었습니다. 연구가 끝날 무렵, 모든 동물을 티 오펜 탈 나트륨 마취 (70mg / kg, 복강 내; Pental Sodium 1g inj., I. E. Ulagay Ilac Sanayi, 이스탄불, 터키)하에 안락사시켰다.
2.3. 측정
샘플을 원심 분리하고 분석 할 때까지 혈청 샘플을 -70 ° C에 보관했습니다. TNF-α (eBioscience Rat TNF-α 키트, 민감도 11 pg / mL, San Diego, CA, USA) 및 IL-10 (eBioscience Rat IL-10kit, 민감도 1.5 pg / mL, San Diego, CA, USA) 수준은 ELISA 리더 (MWGt Lambda Scan 200, USA)가있는 상용 ELISA 키트에 의해 450nm에서 측정되었습니다.
2.4. 통계 분석
그룹의 임신 률은 카이-제곱 테스트를 사용하여 평가하고 TNF-α 및 IL-10의 농도를 ANOVA 및 Tukey 테스트와 비교했습니다. 데이터는 평균 ± SE로 표현됩니다. 각 그룹의 자손 수는 ANOVA 및 Duncan 테스트로 평가되었습니다. 수준에서 의미가 인정되었습니다.
3. 결과
모든 동물은 임신 중에 추적되었습니다. 쥐의 평균 체중은 임신 전 g, 임신 말기에 g였다. Azithromycin은 LPS로 인한 임신 손실을 억제했으며 임신 률에는 부작용이 없었습니다 (표 1). TNF-α 수치는 LPS 군에서 높았고 (), IL-10 수치는 아지트로 마이신과 대조군에서 낮았다 (표 2). 또한 아지트로 마이신 + LPS 군에서 IL-10의 농도는 다른 군보다 유의하게 높았다 (표 2). 새끼 비율은 다른 모든 그룹과 비교할 때 LPS 그룹에서 통계적으로 유의미했습니다 (그림 1).
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| LPS : 지질 다당류 (160 µg kg− 1 정맥 내, 대장균 0111 : B4). a, b 같은 열에있는 다른 문자는 통계적으로 유의합니다 (). | ||||||||||||||||||||||||
4. 의견
이 연구의 목적은 패 혈성 유산에 대한 아지트로 마이신의 효과를 확인하는 것이 었습니다. 프로스타글란딘 또는 사이토 카인과 같은 많은 내인성 물질은 임신 중에 중추적 인 역할을합니다. 재발 성 자연 유산은 고전적으로 3 회 이상의 임신 손실로 정의되며 일반적으로 임신 20 주 전에 발생합니다. 최근, 재발 성 자연 유산은 2 회 이상의 임상 임신의 자연적 상실로 재정의되었습니다. 자연 유산, 조산, 자간전증 및 자궁 내 성장 제한과 같은 불리한 임신 결과는 사이토 카인 네트워크의 규제 완화로 인해 발생할 수 있습니다.
현재 연구에서 아지 스로 마이신만으로는 부작용이 임신 률 (표 1). 아지 스로 마이신의 예방 적 사용은 시술 관련 임신 손실을 줄일 수 있고 임산부에게 안전 할 수 있다고보고되었습니다.
현재 연구에서는 대조군과 아지 스로 마이신 그룹에서 더 높은 임신 률이 확인되었습니다. LPS 그룹 (표 1). 또한 LPS 그룹에서 더 높은 TNF-α 수준이 측정되었습니다 (표 2).산모의 면역 반응은 임신 성공 여부를 결정합니다. 이 질문을 설명하기 위해 동물 모델이 사용되었습니다. 초기 임신 손실의 기전은 여러 염증 분자와 관련이 있습니다. 따라서 염증 모듈의 조절이 유용합니다. 과도한 염증은 자연 유산 및 태아 흡수와 같은 불리한 결과를 초래할 수 있습니다. 이식 부위는 생쥐의 임신 초기에 LPS 및 Th1 사이토 카인 (TNF-α 및 lL-2)에 매우 민감합니다. 이 분자들은 배아 흡수를 유도하는 능력을 가지고 있습니다. 산모의 생존에 영향을주지 않고 저용량의 LPS는 임신 초기에 높은 배아 흡수율을 유발합니다. 사이토 카인 네트워크의 규제 완화는 임신에 부정적인 결과를 초래합니다. IL-10을 포함한 Th2 사이토 카인은 보호 역할을하는 반면 TNF-α를 포함한 Th1 사이토 카인은 임신 중 유산 인자입니다. LPS로 인한 TNF-α 수준의 증가는 불충분 한 태반 관류, 혈전 현상의 개선, 태반 및 태아 저산소증을 초래했습니다. 현재 연구에서 LPS 치료는 TNF-α 수준을 증가시켜 임신 률 감소를 결정했습니다. LPS가 증가한 TNF-α 수치는 반복적 인 임신 손실과 밀접한 관련이 있다고보고되었습니다. 또 다른 연구에서는 자연 태아 소실이있는 환자에서 양수의 LPS 결합 단백질 농도가 증가했습니다.
현재 연구에서 아지트로 마이신은 LPS에 비해 임신 률을 3.5 배 증가 시켰습니다. 그룹 (표 1). 또한, 다른 그룹보다 azithromycin + LPS 그룹에서 IL-10 농도가 더 높았고 (), LPS 그룹보다 azithromycin + LPS 그룹에서 TNF-α 수준이 낮았다 (표 2). Erythromycin과 azithromycin은 산부인과 환자의 자궁 경부 클라미디아 감염 및 마이코 플라스마 폐렴 치료에 사용됩니다. 아지트로 마이신은 장기간 중요한 조직 수준을 제공하기 때문에 자궁 내막 감염에 더 효과적 일 수 있습니다. 아지트로 마이신의 태반 통과는 제한적이며, 아지트로 마이신 및 기타 마크로 라이드 항생제는 일반적으로 임신 중에 안전한 것으로 인정됩니다. 아지트로 마이신 + LPS 그룹 (표 1)의 임신 률 증가는 전 염증성 사이토 카인 생성에 대한 마크로 라이드의 우울 효과와 IL-10 수준에 대한 강화 효과를 반영 할 수 있습니다. 아지트로 마이신을 포함한 마크로 라이드가 TNF-α 수준에 미치는 억제 효과와 IL-10 수준에 대한 이러한 약물의 강화 효과가보고되었습니다. 더욱이 IL-10 주사는 LPS로 인한 낙태를 방지하고 LPS로 인한 태아 사망을 감소시킵니다.
결론적으로, 감염 또는 내 독소 혈증으로 인한 임신 손실은 임신 기간 동안 아지트로 마이신을 사용하여 예방할 수 있습니다.
이해 상충
저자는 다음과 같이 선언합니다. 이해 상충이 없습니다.
감사합니다
저자는 과학적 도움을 주신 Enver YAZAR 박사와 Ibrahim AYDIN 박사에게 감사드립니다.