要約
この研究の目的は、 LPS誘発性流産に対するアジスロマイシンの効果。 36匹の妊娠した雌のウィスターラットを次のように4つの等しいグループに分けました。対照グループ。妊娠10日目に0.3mLの生理食塩水を静脈内投与しました。アジスロマイシン群。妊娠9、10、11日目にアジスロマイシンを350mgkg-1日経口投与。 LPSが妊娠10日目に160μgkg-1で尾静脈から静脈内投与されたリポ多糖群。アジスロマイシン+ LPS群では、アジスロマイシンを妊娠9、10、11日目に350 mg kg-1で経口投与し、LPSを妊娠10日目に160μgkg-1で静脈内投与しました。血液サンプルは、実験の10日目に尾静脈から採取しました。妊娠率が決定されました。腫瘍壊死因子-α（TNF-α）およびインターロイキン（IL-10）のレベルをELISAで測定しました。アジスロマイシンは、LPS誘発性の流産を予防しました。 LPSおよびアジスロマイシン+ LPSグループでそれぞれより高いTNF-αおよびIL-10レベルが測定されました（）。結論として、アジスロマイシンは感染症または内毒素血症に依存する流産に役立つ可能性があります。
1。はじめに
母体の免疫系は、胎児の抗原に対する反応を認識し、拒否することができます。妊娠初期の最も一般的な好ましくない結果の1つは、自然流産です。女性の自然流産の割合は15％〜20％です。しかし、母体感染によって引き起こされる流産の根底にあるメカニズムは明らかではありません。
グラム陰性菌に由来するエンドトキシンであるリポ多糖（LPS）は、妊娠を伴う実験的研究で炎症反応を構成するために使用されてきました。これは、炎症性サイトカインと一酸化窒素を介した流産と早産の引き金としてよく知られています。 Tヘルパー（Th2）サイトカインの主な産生は正常な妊娠の特徴であり、Th1サイトカインの主な産生は流産と再発性流産の特徴です。母体血清中のTh2バイアスサイトカインプロファイルからTh1バイアスサイトカインプロファイルへの変化は、自然流産や子癇前症などの妊婦の合併症を引き起こします。
直接的な抗菌効果に加えて、マクロライド系抗生物質も抗炎症作用を示しますプロパティ 。アジスロマイシンは、エリスロマイシンまたはアモキシシリンと比較して同様の効果があります。アジスロマイシンはまた、クラミジア・トラコマチス感染症の妊婦の治療における副作用が少ないです。この特徴のために、合併症のないクラミジア・トラコマチス感染症の妊婦を治療するためにアジスロマイシンを使用することは、産科医の間で増加しています。アジスロマイシンは、一般的な呼吸器、皮膚/皮膚構造感染症、非淋菌性尿道炎、およびクラミジア・トラコマチスによる子宮頸管炎の治療に臨床的に有効です。アジスロマイシンは妊娠中はクラスBの薬剤に分類されます。
腫瘍壊死因子-α（TNF-α）とインターロイキン（IL-10）のバランスは、妊娠の成功のために決定されます。 TNF-αのレベルが上昇するたびに中絶が起こり、IL-10は妊娠をサポートします。早期流産の適切な予防的治療が存在しないため、アジスロマイシンは、TNF-αに対する抑制効果およびIL-10に対する増強効果のために、LPS誘発性流産を予防する可能性があるとの仮説が立てられています。
この研究の目的は、ラットのLPS誘発流産に対するアジスロマイシンの効果を決定することでした。
2。材料と方法
2.1。動物
研究プロトコルは、トルコのコンヤにあるネクメッティンエルバカン大学実験医学研究応用センターの倫理委員会によって承認されました。この研究では、36匹の雌と9匹の雄のウィスターラット（それぞれgとg、生後5〜6か月）を使用しました。ラットには標準的なペレット飼料を与え、水道水は飲料水として自由に与えられました。動物は、湿度が制御された環境で、室温で12時間の明/暗サイクルで標準的なケージで飼育されました。
2.2。実験手順
LPS（Escherichia coli、血清型O111：B4、Sigma-Aldrich Chemie、ドイツ、ダイゼンホーフェン）およびアジスロマイシン（Zitromax、200 mg / 5 mL、経口懸濁液、ファイザー、イスタンブール、トルコ）を希釈しました。適切な濃度にパイロジェンフリーの生理食塩水で。
雌ラットを雄と1日間ケージに入れ、膣栓の存在を妊娠0日として指定した。ラットの妊娠の10日から12日は、人間の妊娠の最初の学期にほぼ対応します。妊娠ラットは、以下のようにランダムに4つのグループに分けられました。妊娠10日目に3mLの生理食塩水を静脈内投与しました（）;アジスロマイシン群。妊娠9、10、11日目にアジスロマイシンを350 mgkg-1日経口投与した（）;ここで、LPSグループでは、LPSは妊娠10日目に160μgkg-1で尾静脈から静脈内投与されました（）;アジスロマイシン+ LPS群では、アジスロマイシンを妊娠9、10、11日目に350 mg kg-1で経口投与し、LPSを妊娠10日目に160μgkg-1で静脈内投与しました（）。血液サンプルは実験の10日目（LPS投与の3時間後）に尾静脈から採取され、すべての動物は妊娠中に追跡されました。さらに、出産した動物と出産しなかった動物を決定した。研究の終わりに、すべての動物をチオペンタールナトリウム麻酔下で安楽死させた（70 mg / kg、腹腔内; Pental Sodium 1 g inj。、I。E. Ulagay Ilac Sanayi、Istanbul、Turkey）。
2.3。測定
サンプルを遠心分離し、血清サンプルを分析まで-70°Cで保存しました。 TNF-α（eBioscienceRatTNF-αキット、感度11 pg / mL、米国カリフォルニア州サンディエゴ）およびIL-10（eBioscience Rat IL-10kit、感度1.5 pg / mL、米国カリフォルニア州サンディエゴ）のレベルはELISAリーダー（MWGt Lambda Scan 200、USA）を備えた市販のELISAキットによって450nmで測定。
2.4。統計分析
グループの妊娠率はカイ二乗検定を使用して評価され、TNF-αとIL-10の濃度はANOVAとテューキー検定と比較されました。データは平均±SEとして表されます。各グループの子孫の数は、ANOVAおよびダンカン検定によって評価されました。重要性はレベルで受け入れられました。
3。結果
妊娠中はすべての動物を追跡しました。ラットの平均体重は妊娠前はg、妊娠終了時はgでした。アジスロマイシンはLPS誘発性流産を抑制し（）、妊娠率に悪影響はありませんでした（表1）。 TNF-αレベルはLPSグループでより高く（）、IL-10レベルはアジスロマイシンとコントロールグループでより低かった（）（表2）。さらに、アジスロマイシン+ LPSグループのIL-10濃度は、他のグループよりも有意に高かった（）（表2）。他のすべてのグループと比較した場合、LPSグループの子孫率は統計的に有意でした（）（図1）。
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| LPS：リポ多糖（160 µg kg- 1静脈内、Escherichia coli 0111：B4）。 a、b同じ列の異なる文字は統計的に有意です（）。 | ||||||||||||||||||||||||
4。コメント
この研究の目的は、敗血症性流産に対するアジスロマイシンの効果を決定することでした。プロスタグランジンやサイトカインなどの多くの内因性薬剤は、妊娠中に極めて重要な役割を果たします。再発性自然流産は、古典的に3回以上の流産と定義され、通常は妊娠20週前に発生します。最近、再発性の自然流産は、2つ以上の臨床的妊娠の自然流産として再定義されています。自然流産、早産、子癇前症、子宮内胎児発育遅延などの有害な妊娠転帰は、サイトカインネットワークの規制緩和に起因する可能性があります。
現在の研究では、アジスロマイシン単独では、妊娠率（表1）。アジスロマイシンの予防的使用は、手順に関連する流産を減らすことができ、妊娠中の女性に安全である可能性があることが報告されています。
現在の研究では、対照群とアジスロマイシン群でより高い妊娠率が決定されましたLPSグループ（表1）。さらに、LPSグループではより高いTNF-αレベルが測定されました（表2）。母体の免疫反応は妊娠の成功のために決定されます。この質問を解明するために動物モデルが使用されてきました。早期流産の根底にあるメカニズムは、いくつかの炎症性分子に関連しています。したがって、炎症モジュールの調節は有用です。過度の炎症は、自然流産や胎児吸収などの好ましくない結果につながる可能性があります。着床領域は、マウスの妊娠初期にLPSおよびTh1サイトカイン（TNF-αおよびlL-2）に非常に敏感です。これらの分子は、胚の吸収を誘発する能力を持っています。低用量のLPSは、母親の生存に影響を与えることなく、妊娠初期に高率の胚吸収を引き起こします。サイトカインネットワークの規制緩和は、妊娠に悪影響を及ぼします。 IL-10を含むTh2サイトカインは保護的な役割を果たしますが、TNF-αを含むTh1サイトカインは妊娠中絶因子です。 LPSによって引き起こされるTNF-αレベルの増加は、不十分な胎盤灌流、血栓性イベントの改善、および胎盤および胎児の低酸素症をもたらしました。現在の研究では、LPS治療はTNF-αレベルを増加させ、それが妊娠率の低下を決定しました。 LPSの増加したTNF-αレベルは、再発性流産と密接に関連していることが報告されています。別の研究では、羊水中のLPS結合タンパク質の濃度は、自然に胎児が失われた患者で増加しました。
現在の研究では、アジスロマイシンはLPSと比較して妊娠率を3.5倍増加させました。グループ（表1）。さらに、アジスロマイシン+ LPSグループでは他のグループよりも高いIL-10濃度が発生し（）、アジスロマイシン+ LPSグループではLPSグループよりもTNF-αレベルが低かった（）（表2）。エリスロマイシンとアジスロマイシンは、産科患者の子宮頸管内クラミジア感染症とマイコプラズマ肺炎の治療に使用されます。アジスロマイシンは、長期間にわたって重要な組織レベルを提供するため、子宮内膜感染症に対してより効果的である可能性があります。アジスロマイシンの経胎盤通過は制限されており、アジスロマイシンおよび他のマクロライド系抗生物質は一般的に妊娠中に安全であると認められています。アジスロマイシン+ LPSグループの妊娠率の上昇（表1）は、炎症性サイトカイン産生に対するマクロライド系抗生物質の抑制効果とIL-10レベルに対する増強効果を反映している可能性があります。アジスロマイシンを含むマクロライド系抗生物質のTNF-αレベルに対する抑制効果と、これらの薬剤のIL-10レベルに対する増強効果が報告されています。さらに、IL-10注射は、LPS誘発性流産を防ぎ、LPS誘発性胎児死亡を減少させます。
結論として、妊娠期間中にアジスロマイシンを使用することで、感染症または内毒素血症を介した流産を防ぐことができます。
利益相反
著者は次のように宣言しています。利益相反はありません。
謝辞
著者は、科学的支援をしてくれたEnverYAZAR博士とIbrahimAYDIN博士に感謝します。