Résumé
Le but de cette étude était de déterminer leffet de lazithromycine sur la perte de grossesse induite par le LPS. Trente-six rats Wistar femelles gravides ont été divisés en 4 groupes égaux comme suit: groupe témoin, où 0,3 ml de solution saline normale a été administré par voie intraveineuse au jour 10 de la gestation; groupe azithromycine, où lazithromycine a été administrée par voie orale à 350 mg kg-1 jour les jours 9, 10 et 11 de la grossesse; le groupe lipopolysaccharide, où le LPS a été administré par voie intraveineuse via la veine caudale à 160 μg kg-1 au jour 10 de la grossesse; et le groupe azithromycine + LPS, où lazithromycine a été administrée par voie orale à 350 mg kg-1 jour les jours 9, 10 et 11 de la grossesse et le LPS a été administré par voie intraveineuse à 160 μg kg-1 le jour 10 de la grossesse. Des échantillons de sang ont été prélevés dans la veine caudale au jour 10 de lexpérience. Les taux de grossesse ont été déterminés. Les taux de facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α) et dinterleukine (IL-10) ont été mesurés par ELISA. Lazithromycine a empêché la perte de grossesse induite par le LPS Des niveaux plus élevés de TNF-α et dIL-10 ont été mesurés () dans les groupes LPS et azithromycine + LPS, respectivement. En conclusion, lazithromycine peut être utile dans la perte de grossesse dépendante dune infection ou dune endotoxémie.
1. Introduction
Le système immunitaire maternel est capable de reconnaître et de refuser une réponse contre les antigènes fœtaux. Lavortement spontané est lun des résultats défavorables les plus courants au cours du premier trimestre de la grossesse; le taux davortement spontané est de 15% à 20% chez les femmes. Cependant, les mécanismes sous-jacents à la perte de grossesse causée par les infections maternelles ne sont pas clairs.
Le lipopolysaccharide (LPS), une endotoxine dérivée de bactéries à Gram négatif, a été utilisé pour constituer une réponse inflammatoire dans des études expérimentales sur la grossesse. Il est bien connu comme un déclencheur de lavortement et de laccouchement prématuré via les cytokines pro-inflammatoires et loxyde nitrique. La production prédominante de cytokines T-helper (Th2) est une caractéristique de la grossesse normale, tandis quune production prédominante de cytokines Th1 est une caractéristique de lavortement et de lavortement récurrent. Un changement dun profil de cytokine biaisé Th2 à un profil de cytokine biaisé Th1 dans le sérum maternel entraîne des complications pour les femmes enceintes, telles que les avortements spontanés et la prééclampsie.
Outre leffet antimicrobien direct, les macrolides présentent également des effets anti-inflammatoires Propriétés . Lazithromycine a une efficacité similaire à celle de lérythromycine ou de lamoxicilline; Lazithromycine a également moins deffets indésirables dans le traitement des femmes enceintes atteintes dinfections à Chlamydia trachomatis. En raison de cette caractéristique, lutilisation dazithromycine pour traiter les femmes enceintes atteintes dinfections simples à C. trachomatis est en augmentation chez les obstétriciens. Lazithromycine est cliniquement efficace dans le traitement des infections respiratoires courantes, de la peau / des structures cutanées, de lurétrite non gonococcique et de la cervicite due à C. trachomatis. Lazithromycine est classée comme médicament de classe B pendant la grossesse.
Léquilibre entre le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α) et linterleukine (IL-10) est déterminé pour le succès de la grossesse. Chaque fois que le niveau de TNF-α augmente, un avortement se produit, tandis que lIL-10 soutient la grossesse. En raison de linexistence dun traitement préventif adéquat des fausses couches précoces, on a émis lhypothèse que lazithromycine pourrait prévenir les fausses couches induites par le LPS en raison dun effet inhibiteur sur le TNF-α et dun effet potentialisateur sur lIL-10.
Le but de cette étude était de déterminer leffet de lazithromycine sur la perte de grossesse induite par le LPS chez le rat.
2. Matériel et méthodes
2.1. Animal
Le protocole détude a été approuvé par le Comité déthique de lUniversité Necmettin Erbakan, Centre de médecine expérimentale, de recherche et dapplication, Konya, Turquie. Trente-six rats Wistar femelles et 9 mâles (g et g, respectivement, âgés de 5 à 6 mois) ont été utilisés dans cette étude. Les rats ont été nourris avec un régime granulé standard et de leau du robinet a été fournie à volonté comme eau de boisson. Les animaux ont été élevés dans des cages standard sur un cycle lumière / obscurité de 12 heures à température ambiante dans un environnement à humidité contrôlée.
2.2. Procédure expérimentale
LPS (Escherichia coli, sérotype O111: B4, Sigma-Aldrich Chemie, Deisenhofen, Allemagne) et azithromycine (Zitromax, 200 mg / 5 ml, suspension buvable, Pfizer, Istanbul, Turquie) ont été dilués avec une solution saline apyrogène à des concentrations appropriées.
Des rats femelles ont été mis en cage avec des mâles pendant 1 jour et la présence dun bouchon vaginal a été désignée comme jour 0 de la grossesse. Le dixième au douzième jour de la grossesse d’un rat correspond à peu près au premier trimestre de la grossesse humaine. Les rates gravides ont été réparties au hasard en 4 groupes comme suit: groupe témoin, où 0.3 mL de solution saline normale ont été administrés par voie intraveineuse au jour 10 de la grossesse (); groupe azithromycine, où lazithromycine a été administrée par voie orale à 350 mg kg-1 jour les jours 9, 10 et 11 de la grossesse (); dans le groupe LPS, le LPS a été administré par voie intraveineuse via la veine caudale à 160 μg kg-1 au jour 10 de la grossesse (); et le groupe azithromycine + LPS, où lazithromycine a été administrée par voie orale à 350 mg kg-1 jour les jours 9, 10 et 11 de la grossesse et le LPS a été administré par voie intraveineuse à 160 μg kg-1 le jour 10 de la grossesse (). Des échantillons de sang ont été prélevés dans la veine caudale au jour 10 de lexpérience (3 heures après ladministration du LPS) et tous les animaux ont été suivis pendant la gestation. De plus, les animaux qui ont mis bas et qui nont pas mis bas ont été déterminés. À la fin de létude, tous les animaux ont été euthanasiés sous anesthésie au thiopental sodique (70 mg / kg, par voie intrapéritonéale; Pental Sodium 1 g inj., I. E. Ulagay Ilac Sanayi, Istanbul, Turquie).
2.3. Mesures
Les échantillons ont été centrifugés et les échantillons de sérum ont été conservés à -70 ° C jusquà lanalyse. Les niveaux de TNF-α (kit eBioscience Rat TNF-α, sensibilité 11 pg / mL, San Diego, CA, USA) et IL-10 (eBioscience Rat IL-10kit, sensibilité 1,5 pg / mL, San Diego, CA, USA) étaient déterminé à 450 nm par des kits ELISA commerciaux avec lecteur ELISA (MWGt Lambda Scan 200, USA).
2.4. Analyse statistique
Les taux de grossesse des groupes ont été évalués à laide dun test du chi carré, et les concentrations de TNF-α et dIL-10 ont été comparées à lANOVA et au test de Tukey. Les données sont exprimées sous forme de moyenne ± SE. Le nombre de descendants dans chaque groupe a été évalué par ANOVA et test de Duncan. Limportance a été acceptée au niveau.
3. Résultats
Tous les animaux ont été suivis pendant la gestation. Le poids moyen des rats était de g avant la gestation et de g en fin de gestation. Lazithromycine a inhibé les fausses couches induites par le LPS et il ny a eu aucun effet indésirable sur le taux de grossesse (tableau 1). Le taux de TNF-α était plus élevé () dans le groupe LPS, et les taux dIL-10 étaient inférieurs () dans les groupes azithromycine et témoin (tableau 2). De plus, la concentration dIL-10 dans le groupe azithromycine + LPS était significativement plus élevée () que dans les autres groupes (tableau 2). Le taux de progéniture était statistiquement significatif () dans le groupe LPS par rapport à tous les autres groupes (figure 1).
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| LPS: lipopolysaccharide (160 µg kg− 1 par voie intraveineuse, Escherichia coli 0111: B4). a, bDifférentes lettres dans la même colonne sont statistiquement significatives (). | ||||||||||||||||||||||||
4. Commentaire
Le but de cette étude était de déterminer leffet de lazithromycine sur lavortement septique. De nombreux agents endogènes, tels que les prostaglandines ou les cytokines, jouent un rôle central pendant la grossesse. Les avortements spontanés récurrents sont classiquement définis comme trois pertes de grossesse ou plus et surviennent généralement avant 20 semaines de gestation. Récemment, lavortement spontané récurrent a été redéfini comme la perte spontanée de deux grossesses cliniques ou plus. Les issues indésirables de la grossesse, telles que lavortement spontané, le travail prématuré, la prééclampsie et le retard de croissance intra-utérin, peuvent résulter dune dérégulation des réseaux de cytokines.
Dans létude actuelle, lazithromycine seule na pas présenté deffet négatif sur le taux de grossesse (tableau 1). Il a été rapporté que lutilisation prophylactique de lazithromycine peut diminuer les fausses couches liées à la procédure et peut être sans danger chez les femmes enceintes.
Dans létude actuelle, des taux de grossesse plus élevés ont été déterminés dans les groupes témoin et azithromycine que dans le groupe LPS (tableau 1). De plus, un taux de TNF-α plus élevé a été mesuré dans le groupe LPS (tableau 2).La réponse immunitaire maternelle est déterminée pour le succès de la grossesse. Des modèles animaux ont été utilisés pour élucider cette question. Le mécanisme sous-jacent de la perte de grossesse précoce est associé à plusieurs molécules inflammatoires; ainsi, la modulation des modules inflammatoires est utile. Une inflammation excessive peut conduire à des résultats défavorables, tels quun avortement spontané et une résorption fœtale. Les zones dimplantation sont extrêmement sensibles aux cytokines LPS et Th1 (TNF-α et lL-2) au début de la grossesse chez la souris. Ces molécules ont la capacité dinduire une résorption embryonnaire. De faibles doses de LPS, sans affecter la survie de la mère, entraînent des taux élevés de résorption embryonnaire au début de la grossesse. La dérégulation des réseaux de cytokines entraîne des issues défavorables de la grossesse. Les cytokines Th2, dont lIL-10, ont un rôle protecteur, tandis que les cytokines Th1, dont le TNF-α, sont des facteurs abortifs pendant la grossesse. Laugmentation des taux de TNF-α causée par le LPS a entraîné une perfusion placentaire insuffisante, une amélioration des événements thrombotiques et une hypoxie placentaire et fœtale. Dans létude actuelle, le traitement LPS a augmenté le taux de TNF-α, ce qui a déterminé une diminution du taux de grossesse. Il a été rapporté que le taux de TNF-α augmenté de LPS est étroitement lié à une fausse couche récurrente. Dans une autre étude, la concentration de protéine liant le LPS dans le liquide amniotique a été augmentée chez les patientes qui avaient une perte foetale spontanée.
Dans létude actuelle, lazithromycine a multiplié par 3,5 le taux de grossesse par rapport au LPS groupe (tableau 1). De plus, une concentration dIL-10 plus élevée () sest produite dans le groupe azithromycine + LPS que celles des autres groupes, et le taux de TNF-α était plus faible () dans le groupe azithromycine + LPS que dans le groupe LPS (tableau 2). Lérythromycine et lazithromycine sont utilisées dans le traitement des infections endocervicales à chlamydia et de la pneumonie à mycoplasme chez les patients obstétricaux. Lazithromycine peut être plus efficace contre les infections de lendomètre car elle fournit des niveaux tissulaires importants pendant une longue période. Le passage transplacentaire de lazithromycine est limité et lazithromycine et dautres antibiotiques macrolides sont généralement reconnus comme étant sans danger pendant la grossesse. Laugmentation des taux de grossesse dans le groupe azithromycine + LPS (tableau 1) peut refléter leffet dépressif des macrolides sur la production de cytokines pro-inflammatoires et leffet potentialisateur sur le taux dIL-10. Les effets suppressifs des macrolides, y compris lazithromycine, sur le taux de TNF-α et les effets potentialisateurs de ces médicaments sur le taux dIL-10 ont été rapportés. De plus, les injections dIL-10 préviennent les avortements induits par le LPS et diminuent la mort fœtale induite par le LPS.
En conclusion, lutilisation de lazithromycine pendant la période de grossesse peut prévenir les fausses couches causées par une infection ou une endotoxémie.
Conflit dintérêts
Lauteur déclare que il ny a pas de conflit dintérêts.
Remerciements
Lauteur remercie le Dr Enver YAZAR et le Dr Ibrahim AYDIN pour lassistance scientifique.