Azithromycin forhindrer graviditetstab: Reduktion af niveauet af tumornekrosefaktor-alfa og hævning af niveauet af interleukin-10 hos rotter

Abstrakt

Formålet med denne undersøgelse var at bestemme virkningen af azithromycin på LPS-induceret graviditetstab. 36 gravide Wistar hunrotter hunkøn blev opdelt i 4 lige store grupper som følger: kontrolgruppe, hvor 0,3 ml normal saltopløsning blev administreret intravenøst på dag 10 af graviditeten; azithromycin-gruppe, hvor azithromycin blev indgivet oralt ved 350 mg kg − 1 dag på dag 9, 10 og 11 af graviditeten; lipopolysaccharidgruppe, hvor LPS blev administreret intravenøst via halevenen ved 160 μg kg -1 på graviditetens dag 10; og azithromycin + LPS-gruppen, hvor azithromycin blev administreret oralt ved 350 mg kg − 1 dag på graviditetens dag 9, 10 og 11, og LPS blev administreret intravenøst ved 160 μg kg − 1 på graviditetens dag 10. Blodprøver blev opnået fra halevenen på dag 10 i eksperimentet. Graviditetsrater blev bestemt. Tumornekrosefaktor-alfa (TNF-α) og interleukin (IL-10) niveauer blev målt ved ELISA. Azithromycin forhindrede () LPS-induceret graviditetstab. Højere TNF-a- og IL-10-niveauer blev målt () i henholdsvis LPS- og azithromycin + LPS-grupperne. Afslutningsvis kan azithromycin være nyttigt ved infektions- eller endotoksæmi-afhængigt graviditetstab.

1. Introduktion

Moderens immunsystem er i stand til at genkende og nægte et svar mod føtale antigener. Et af de mest almindelige ugunstige resultater i graviditetens første trimester er spontan abort; frekvensen af spontan abort er 15% –20% hos kvinder. De mekanismer, der ligger til grund for graviditetstab forårsaget af moderinfektioner, er imidlertid ikke klare.

Lipopolysaccharid (LPS), et endotoksin afledt af gramnegative bakterier, er blevet anvendt til at udgøre inflammatorisk respons i eksperimentelle studier med graviditet. Det er velkendt som en udløser for abort og for tidlig fødsel via proinflammatoriske cytokiner og nitrogenoxid. Den overvejende produktion af T-hjælper (Th2) -cytokiner er karakteristisk for normal graviditet, mens en overvejende produktion af Th1-cytokiner er et kendetegn for abort og tilbagevendende abort. En ændring fra en Th2-forudindtaget til en Th1-forudindtaget cytokinprofil i moderens serum resulterer i komplikationer for gravide kvinder, såsom spontane aborter og præeklampsi.

Udover den direkte antimikrobielle effekt viser makrolider også antiinflammatorisk ejendomme . Azithromycin har lignende virkning sammenlignet med erythromycin eller amoxicillin; azithromycin har også færre bivirkninger ved behandling af gravide kvinder med Chlamydia trachomatis-infektioner. På grund af denne funktion stiger brugen af azithromycin til behandling af gravide kvinder med ukomplicerede C. trachomatis-infektioner blandt fødselslæger. Azithromycin er klinisk effektiv til behandling af almindelige luftvejsinfektioner, hud / hudstrukturinfektioner, nongonokok urethritis og cervicitis på grund af C. trachomatis. Azithromycin er kategoriseret som et klasse B-lægemiddel under graviditet.

Balancen mellem tumornekrosefaktor-alfa (TNF-α) og interleukin (IL-10) bestemmes for graviditetssucces. Når niveauet af TNF-α stiger, forekommer abort, mens IL-10 understøtter graviditeten. På grund af manglende eksistens af en passende forebyggende behandling af tidligt graviditetstab er det blevet antaget, at azithromycin kan forhindre LPS-induceret graviditetstab på grund af en hæmmende virkning på TNF-α og potentierende virkning på IL-10.

Formålet med denne undersøgelse var at bestemme virkningen af azithromycin på LPS-induceret graviditetstab hos rotter.

2. Materialer og metoder

2.1. Dyr

Undersøgelsesprotokollen blev godkendt af den etiske komité for Necmettin Erbakan University, eksperimentel medicin, forsknings- og applikationscenter, Konya, Tyrkiet. 36 hun- og 9 Wistar-hanrotter (henholdsvis g og g, 5-6 måneder gamle) blev brugt i denne undersøgelse. Rotter blev fodret med en standard pelleteret diæt, og ledningsvand blev leveret ad libitum som drikkevand. Dyr blev opdrættet i standardbure på en 12 timers lys / mørk cyklus ved stuetemperatur i et fugtighedsstyret miljø.

2.2. Eksperimentel procedure

LPS (Escherichia coli, serotype O111: B4, Sigma-Aldrich Chemie, Deisenhofen, Tyskland) og azithromycin (Zitromax, 200 mg / 5 ml, oral suspension, Pfizer, Istanbul, Tyrkiet) blev fortyndet med pyrogenfri saltvand til passende koncentrationer.

Hunrotter blev buret med hanner i 1 dag, og tilstedeværelsen af en vaginal prop blev betegnet som graviditetens dag 0. Tiende til 12. dag i en rotts graviditet svarer omtrent til den første trimester af graviditet hos mennesker. Gravide rotter blev tilfældigt opdelt i 4 grupper som følger: kontrolgruppe, hvor 0.3 ml normal saltopløsning blev administreret intravenøst på dag 10 af graviditeten (); azithromycin-gruppe, hvor azithromycin blev indgivet oralt ved 350 mg kg − 1 dag på dag 9, 10 og 11 af graviditeten (); hvor LPS-gruppen blev LPS administreret intravenøst via halevenen ved 160 μg kg -1 på graviditetens dag 10 (); og azithromycin + LPS-gruppen, hvor azithromycin blev administreret oralt ved 350 mg kg − 1 dag på dag 9, 10 og 11 af graviditeten, og LPS blev administreret intravenøst ved 160 μg kg − 1 på dag 10 af graviditeten (). Der blev opnået blodprøver fra halevenen på dag 10 i eksperimentet (3 timer efter LPS-administration), og alle dyr blev fulgt under drægtighed. Derudover blev dyr bestemt, der fødte og ikke fødte. Ved afslutningen af undersøgelsen blev alle dyr aflivet under thiopental natriumanæstesi (70 mg / kg, intraperitonealt; Pental Sodium 1 g inj., I. E. Ulagay Ilac Sanayi, Istanbul, Tyrkiet).

2.3. Målinger

Prøver blev centrifugeret, og serumprøver blev opbevaret ved -70 ° C indtil analyse. TNF-α (eBioscience Rat TNF-α-kit, følsomhed 11 pg / ml, San Diego, CA, USA) og IL-10 (eBioscience Rat IL-10kit, følsomhed 1,5 pg / ml, San Diego, CA, USA) var niveauer bestemt ved 450 nm ved kommercielle ELISA-sæt med ELISA-læser (MWGt Lambda Scan 200, USA).

2.4. Statistisk analyse

Graviditetsgraden for grupperne blev evalueret ved hjælp af en chi-kvadrat-test, og koncentrationerne af TNF-α og IL-10 blev sammenlignet med ANOVA og Tukey-testen. Data udtrykkes som middelværdien ± SE. Antallet af afkom i hver gruppe blev evalueret ved ANOVA- og Duncan-test. Betydning blev accepteret på niveauet.

3. Resultater

Alle dyr blev fulgt under drægtighed. Rotternes gennemsnitlige vægt var g før graviditet og g ved graviditetens afslutning. Azithromycin hæmmede () LPS-induceret graviditetstab, og der var ingen bivirkninger på graviditetsraten (tabel 1). TNF-α-niveauet var højere () i LPS-gruppen, og IL-10-niveauet var lavere () i azithromycin- og kontrolgrupperne (tabel 2). Derudover var koncentrationen af IL-10 i azithromycin + LPS-gruppen signifikant højere () end de andre grupper (tabel 2). Afkomhastighed var statistisk signifikant () i LPS-gruppen sammenlignet med alle andre grupper (figur 1).

Figur 1

Antallet af afkom i grupper. For at inducere graviditetstabet med LPS blev 160 μg kg -1 LPS (Escherichia coli 0111: B4) administreret intravenøst via halevenen på dag 10 af graviditeten i LPS-gruppen. Azithromycin blev administreret oralt ved 350 mg kg − 1 dag på graviditetens dag 9, 10 og 11 i azithromycin- og azithromycin + LPS-grupper. Blodprøver blev opnået fra halevenen på dag 10 i eksperimentet, og alle dyr blev fulgt under drægtighed. Dyr, der fødte og ikke fødte, blev bestemt. Forskellige bogstaver er statistisk signifikante ().

4. Kommentar

Formålet med denne undersøgelse var at bestemme virkningen af azithromycin på septisk abort. Mange endogene stoffer, såsom prostaglandiner eller cytokiner, spiller en afgørende rolle under graviditeten. Tilbagevendende spontan abort defineres klassisk som tre eller flere graviditetstab og forekommer normalt inden 20 ugers svangerskab. For nylig er tilbagevendende spontan abort blevet omdefineret som det spontane tab af to eller flere kliniske graviditeter. Uønskede graviditetsresultater, såsom spontan abort, for tidlig fødsel, præeklampsi og intrauterin vækstbegrænsning, kan skyldes en deregulering af cytokinnetværk.

I den nuværende undersøgelse udviste azithromycin alene ikke en negativ effekt på graviditet (tabel 1). Det er blevet rapporteret, at den profylaktiske anvendelse af azithromycin kan mindske procedurerelateret graviditetstab og kan være sikker hos gravide kvinder.

I den nuværende undersøgelse blev højere graviditetsrater bestemt i kontrol- og azithromycin-grupperne end i LPS-gruppen (tabel 1). Derudover blev et højere TNF-α-niveau målt i LPS-gruppen (tabel 2).Moderens immunrespons bestemmes for graviditetssucces. Dyremodeller er blevet brugt til at belyse dette spørgsmål. Mekanismen bag tidligt graviditetstab er forbundet med flere inflammatoriske molekyler; således er modulering af de inflammatoriske moduler nyttig. Overdreven betændelse kan føre til ugunstige resultater, såsom spontan abort og føtal resorption. Implantationsområder er ekstremt følsomme over for LPS- og Th1-cytokiner (TNF-α og lL-2) under tidlig graviditet hos mus. Disse molekyler har evnen til at inducere embryonal resorption. Lave doser af LPS uden at påvirke moderens overlevelse forårsager høje embryonale resorptionshastigheder under den tidlige graviditet. Deregulering af cytokinnetværk resulterer i ugunstige graviditetsresultater. Th2-cytokiner, herunder IL-10, har en beskyttende rolle, mens Th1-cytokiner, herunder TNF-α, er abortfaktorer under graviditet. Øgede TNF-α-niveauer forårsaget af LPS resulterede i utilstrækkelig placenta-perfusion, forbedring af trombotiske hændelser og placenta og føtal hypoxi. I den aktuelle undersøgelse øgede LPS-behandlingen TNF-α-niveauet, hvilket bestemte et fald i graviditetsraten. Det er blevet rapporteret, at det LPS-øgede TNF-α-niveau er tæt knyttet til tilbagevendende graviditetstab. I en anden undersøgelse blev koncentrationen af LPS-bindende protein i fostervand øget hos patienter, der havde et spontant fostertab.

I den aktuelle undersøgelse øgede azithromycin graviditetsraten 3,5 gange sammenlignet med LPS gruppe (tabel 1). Derudover forekom en højere IL-10-koncentration () i azithromycin + LPS-gruppen end de andre grupper, og TNF-α-niveauet var lavere () i azithromycin + LPS-gruppen end LPS-gruppen (tabel 2). Erythromycin og azithromycin anvendes til behandling af endocervikale chlamydiale infektioner og mycoplasma-lungebetændelse hos obstetriske patienter. Azithromycin kan være mere effektiv mod endometrieinfektioner, fordi det giver vigtige vævsniveauer i en lang periode. Transplacental passage af azithromycin er begrænset, og azithromycin og andre makrolidantibiotika accepteres generelt at være sikre under graviditet. Øgede graviditetsrater i azithromycin + LPS-gruppen (tabel 1) kan afspejle den depressive virkning af makrolider på proinflammatorisk cytokineproduktion og den forstærkende virkning på IL-10-niveauet. De undertrykkende virkninger af makrolider, herunder azithromycin, på TNF-α-niveauet og de potentierende virkninger af disse lægemidler på IL-10-niveauet er rapporteret. Desuden forhindrer IL-10-injektioner LPS-induceret abort og nedsætter LPS-induceret fosterdød.

Som konklusion kan infektions- eller endotoksæmi-medieret graviditetstab forhindres ved anvendelse af azithromycin i graviditetsperioden.

Interessekonflikt

Forfatteren erklærer, at der er ingen interessekonflikt.

Anerkendelser

Forfatteren takker Dr. Enver YAZAR og Dr. Ibrahim AYDIN for den videnskabelige hjælp.